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粤东丰溪林场斑点热疫源地
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广告招租，e-mail:yesize@hotmail.com 摘要 本文采用现场调查方法、血清学方法、病原分离方法和分子流行病学方法在广东省大埔县丰溪林场进行了斑点热疫源地调查，共调查了7个自然村，282个健康人，30头牛，2只羊、7个品种共53只野鼠及从野外和动物体表收集3个品种共494只蜱。结果表明：大埔县林区的优势鼠种为褐家鼠和黄毛鼠；鼠的带蜱率为15．09％（8／53）；牛和羊的带蜱率均为100％（30／30，2／2）；解剖后观察脏器有病变的鼠占鼠总数的49．05（26／53）。优势蜱种为金泽革蜱、豪猪血蜱和台湾角血蜱。健康人群血清中西伯利亚立克次体抗体阳性率为10．28％（29／282）；康氏立克次体抗体阳性率为3．90％（11／282）；小蛛立克次体阳性率为5．67％（16／282）。鼠血清中三种立克次体抗体阳性率分别为13．33％（4／30）、3．33％（1／30）和10．00％（3／30）。牛血清中三种立克次体抗体阳性率分别为8．00％（2／26）、4．00％（1／25）和4．00％（1／25）。 INVESTIGATION OF NATURAL FOCI WITH SPOTTED FEVER IN EASTERN OF GUANGDONG PROVINCE Zhang Jianzhi Bi Dezeng He Jinrong et al (Institute of Epidemiology and Microbiology,Chinese Academy of Preventive Medicine,Beijing 102206) ABSTRACT Investigation of natural foci with spotted fever were performed in Dapu county of Guangdong Province．282 healthy persons，53 wild mice，30 cattle，2 sheep and 494 ticks were investigated.The results show that the major wild mice are Rattus norvegicus and R．losea in Dapu county，the tick-bearing rate were respectively 15．09％（8／35），100％（35／35）and 100％（2／2）in wild mice，sheep and cattle，the morbidity rate of mice was 49．09％（26／53）；the major ticks were Haemaphysalis cornigera taiwana，Dermacentor auratus and H．hystricis；the prevalence of antibodies to R．sibirica，R．conorii and R．akari were respectively 10．28％（29／282），3．90％（11／282）and 5．67％（16／282）among healthy persons；respectively 13．33％（4／30） ，3．33％（1／30）and 10．00％（3／30）in wild mice and respectively 8．00％（2／25），4．00％（1／25）and 4．00％（1／25）in cattle． KEY WORDS Spotted Fever Natural foci 广东省大埔县林区斑点热群立克次体在人群的感染已被我们以往的工作所证实［1］。为了进一步查明大埔县林区斑点热群立克次体在人群及动物中的感染情况及疫源地的类型，1997年我们采用了现场调查方法、血清学方法、病原分离方法和分子流行病学方法对大埔县林区进行了斑点热疫源地的进一步调查，现将调查结果报告如下： 1 内容与方法 1.1 地理景观的调查 在大埔县丰溪林场选点进行地理景观的调查，共调查了红科、水口、溪口、七里溪、坪华、丰村及场部7个地点。 1.2 宿主动物和媒介昆虫调查 选择不同的生境布笼捕捉小兽，主要是啮齿动物和食虫目动物，捕捉到动物后先检查其体表是否寄生有蜱或螨，继而收集之，然后无菌解剖，收集血清及肝脏和脾脏，－20℃保存备用。牛和羊的调查采用先查体表寄生蜱后采血的方法进行。 1.3 血清学调查 人血清标本282份，鼠血清30份和牛血清25份，系1997年4月采自广东省大埔县林区。采用微量室温补体结合试验法对上述血清进行检测；抗原、阳性兔血清、绵羊红细胞由本室自制；冻干补体、溶血素均购自中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所布病室；所有血清用前均做1∶8稀释，56℃灭活30min。试验时设待检血清抗补体对照、抗原抗补体对照、阳性血清对照、溶血系统对照、补体对照。 结果判定：在对照孔都成立的情况下，以实验孔出现完全不溶或微溶孔最高的血清稀释倍数为最终滴度。1∶8(＋＋)及以上判为阳性，1∶32为现患诊断；同源滴度高于异源≥2倍者为血清学分型依据。 1.4 病原学检测 应用鸡胚卵黄囊培养法直接从啮齿动物和蜱标本中分离斑点热群立克次体。参照文献〔2〕进行。 1.5 分子流行病学检测 用PCR技术检测啮齿动物脏器和蜱标本中所含斑点热群立次体特异的DNA片段。PCR所选引物为斑点热群立克次体群特异引物（Rr 190.70p和Rr190.602n）和立克次体属特异引物（RpCS.877p和Rpcs.1258n）。参照文献〔3〕进行。 2 结果 2.1 地理景观 大埔县丰溪林场位于广东省东北部，距县城约54km，地理位置为北纬24°39′，东经116°47′，东起耀子石，西至尖笔，南至防空哨，北至尖石；西北部与福建省永定县城关公社毗邻。全区面积16047亩，区内有七里溪、暂背溪两条山溪，流入汀江，整个山溪属水珠山系，山峦重迭，地势较高，海拔一般在600～800m之间，最高1030m（尖笔），山坡坡度约为25°～60°。该地区属于亚热带气候，常年气候温和，雨量充沛，年平均气温21℃，月平均最高气温在7月，为34.1℃，月平均最低温度在1月，为7.3℃；年平均降雨量1490.5mm，但雨量分布不均，多集中于雨季4～9月份。占年降雨量的77％，月最大降雨量在6月，为271.8mm；旱季是10月至翌年3月，多为80mm以下，最少在12月为33.5mm。年平均蒸发量1534.6mm，平均相对湿度为79％。每年春、夏、秋多吹东南风。冬季盛行北风，平均风速1m/s。年平均4次台风，最多7次。霜期为11月至翌年3月。区内主要岩石为砂岩，土壤多为红壤，少数为黄壤，土层厚度50～100cm左右，林内土表普遍复盖着一层较厚的枯枝落叶。因此富含腐植质，团粒结构良好，肥力较高。丰溪林区是我国东南部仅有的而且保留较为完整的亚热带常绿叶林地区，现状植被为原始次生林，林木主要为亚热带常绿阔叶次生林，亦有少数是热带成分，七里溪保留一片千亩以上的茂密的原始次生林，为动物栖息创造了良好的环境条件，动物资源也很丰富。 2.2 宿主动物和媒介昆虫调查 2.2.1 宿主动物 共捕获啮齿动物53只，计2个属7个种：黄毛鼠（Rattus losea）、针毛鼠（R·fulvescens）、褐家鼠（R.norvegicus）、灰家鼠（R.berdmorei）、青毛鼠（R.bowersii）、白腹鼠（R.edwardsi）、小家鼠（Mus musculus）。优势种为褐家鼠、黄毛鼠和针毛鼠，分别占鼠总数的39.6％（21／53）、35.8％（19／53）和15.1％（8／53）。8只鼠带蜱或螨，8只鼠有蜱叮咬的伤痕；排除被蜱叮咬的鼠，鼠的总带蜱率为15.1％（8／53）。解剖后观察其肝脏、脾脏和肾脏发现26只鼠的脏器有不同程度的病变，脏器有病变的鼠占鼠总数的49.1％（26／53），其中有病变的褐家鼠占鼠总数的28.30％（15／53）、黄毛鼠占16.99％（9／53）、针毛鼠占3.77％（2／53）。除了啮齿动物外，我们还调查了30只牛和2只羊，在30只牛和2只羊体表都发现了不同数量的蜱寄生，牛和羊的总带蜱率为100％（35／35、2／2）。 2.2.2 媒介昆虫 共从野外和动物体表收集494只蜱和螨，蜱共计3个品种：台湾角血蜱（Haemaphysalis cornigera Taiwana）、金泽革蜱（Dermacentor auratus）和豪猪血蜱（H.hystricis）。牛和羊体表的寄生蜱主要是台湾角血蜱，而野外捕获主要是金泽革蜱和豪猪血蜱。 2.3 血清学检测结果 2.3.1 健康人群血清斑点热群立克次体抗体检测结果 282例健康人群血清中西伯利亚立克次体抗体阳性率为10.28％（29／282）；康氏立克次体抗体阳性率为3.90％（11／282）；小蛛立克次体阳性率为5.67％（16／282）。 2.3.2 啮齿动物血清斑点热群立克次体抗体检测结果 30份鼠血清中西伯利亚立克次体抗体阳性4份，阳性率为13.33％（4／30）；康氏立克次体抗体阳性1份，阳性率为3.33％（1／30）；小蛛立克次体抗体阳性3份，阳性率为10.00％（3／30）。 2.3.3 牛血清斑点热群立克次体抗体检测结果 25份牛血清中西伯利亚立克次体抗体阳性2份，阳性率为8.00％（2／25）；康氏立克次体抗体阳性1份，阳性率为4.00％（1／25）；小蛛立克次体抗体阳性1份，阳性率为4.00％（1／25）。 2.4 病原学及分子流行病学检测结果 应用鸡胚卵黄囊培养法直接从啮齿动物和蜱标本中分离斑点热群立克次体，及用斑点热群立克次体群特异引物（Rr 190.60p和Rr 190.602n）和立克次体属特异引物（Rpcs8.77p和Rpcs.1258n）扩增啮齿动物和蜱标本中所含斑点热群立克次体特异的DNA片段均未获得阳性结果。 3 讨论 斑点热群立克次体（Spotted Fever Group Rickettsia SFGR）是一类严格的活细胞内寄生的原核细胞型微生物，天然寄生在各种吸血节肢动物如蜱和螨的体内，借此维持生存并在自然界的许多脊椎动物中分布，人只是偶然地介入了节肢动物媒介与其宿主动物之间感染的自然环节，才被该群立克次体感染而患病［4］。正因为如此，该群立克次体所致的疾病又称蜱媒疾病或自然疫源性疾病。由于自然疫源性疾病特征，彻底消灭很困难，因此，了解和深入研究该病的疫源地，对于预防和控制该病的发生和流行就有了很重要的公共卫生意义。 本次研究采用了现场调查方法、血清学方法、病原分离方法和分子流行病学方法在广东省大埔县林区进行斑点热疫源地调查，共调查了七个自然村，282个健康人，30头牛，2只羊、7个品种共53只野鼠及从野外和动物体表收集3个品种共494只蜱。结果表明：大埔县林区的优势鼠种为褐家鼠和黄毛鼠；鼠的带蜱率为15.09％（8／53）牛和羊的带蜱率均为100％（30／30，2／2）；解剖后观察鼠脏器患病率为49.05（26／53）。282例健康人群血清中西伯利亚立克次体抗体阳性率为10.28％（29／282）；康氏立克次体抗体阳性率为3.90%(11/282)；小蛛立克次体抗体阳性率为5.67%(16/282)。鼠血清中三种立 克次体抗阳性率分别为13.33％（4／30）、3.33％（1／30）和10.00％（3／30）。牛血清中三种立克次体抗体体阳性率分别为8.00％（2／25）、4.00％（1／25）和4.00％（1／25）。这些结果表明大埔县林区人和动物均存在有斑点热群立克次体所致的感染。 斑点热是一组经蜱或螨传播的疾病，蜱或螨既是重要的传播媒介，又可经卵传递立克次体，成为保菌宿主［4］。因此，有利于蜱和螨栖息的生态环境是斑点热的疫源地的先决条件。大埔县丰溪林场位于广东省东北部，北纬24°39，东经116°47，属于亚热带气候，常年气候温和，雨量充沛，年平均气温21℃，最冷月份1月为7.3℃；年平均相对湿度79％；年平均降雨量1490.5mm；现状植被为原始次生林，林木主要为亚热带常绿阔叶次生林，这样的生态环境对蜱或螨的栖息非常有利。在我们的调查中发现：丰溪林场牛和羊的带蜱率均为100％（30／30，2／2），且当地居民多有被蜱叮咬史，这些结果进一步证实大埔县林区存在有斑点热群立克次体寄生的宿主。另外我们还发现：牛和羊的带蜱率不仅高，而且均为台湾角血蜱。台湾角血蜱是一类具有叮咬人和动物能力的吸血蜱。有人曾在该蜱中分离到了莱姆病的病原体［6］。据国外文献报告莱姆病的病原体往往与人类粒细胞性埃立克体病的病原体在蜱中共生［7］。该病原体是否与斑点热群立克次体在蜱中共生及该蜱在斑点热群立克次体的传播和保菌中的意义尚不清楚，有待于进一步的研究。 在这次调查中我们还发现：现场的鼠被解剖后，49.06％（26／53）的鼠脏器有病变，且在蜱活动的高峰季节当地居民多有不明原因的发热性疾病，这些线索也提示当地存在有蜱媒疾病。在本次研究中我们应用鸡胚卵黄囊培养法和用PCR技术均未从啮齿动物和蜱标本中分离斑点热群立克次体和检测出斑点热群立克次体特异的DNA片段，这可能与鸡胚卵黄囊直接分离立克次体方法的敏感性低、标本保存条件不好或时间太长及PCR实验时现场标本的处理方法有关。尽管如此，大埔县丰溪林场独特的生态环境和地理景观、牛和羊很高的带蜱率、啮齿动物脏器49.06％的患病率及人和动物血清中斑点热群立克次体抗体的检出率都说明大埔县林区存在有斑点热的疫源地。 4 参考文献 1.张健之，郭衍，贺金荣，等.广东省首次发现斑点热群立克次体的感染.疾病监测，1998年待发表. 2.毕德增，张健之，范明远，等.用鸡胚卵黄囊直接分离斑点热群立克次体.中国媒介生物及控制杂志，1997，8（1）：47. 3.Regnery RL，Spruil CL and Plikaytis B.Genotypical identification of rickettsiae and estimation ofintraspecies sequence divergence for portions of two rickettsial genes. J Bact，1991,173：1576. 4.范明远，余树荣，张健之.斑点热.于恩庶，等.主编.中国人兽共患病学，第2版，福建科学技术出版社 1996.533. 5.郭衍，万康林，许世锷，等.从粤东丰溪自然保护区台湾角血蜱体内分离出莱姆病螺旋体.中国媒介生物学及控制杂志，1998年第6期待发表. 6.张健之，范明远.美国首届人类埃立克体病专题讨论会报告.中国微生物学会通讯 1997,3：27.
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